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人骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 （BMP-2）酶免試劑盒說明書
2020-10-19 瀏覽次數(shù)：2677
1. 人骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 (BMP-2)酶免試劑盒背景介紹:
骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 (BMP-2)屬于TGF-β超家族蛋白。和其他的骨形態(tài)發(fā)生蛋白一樣，BMP-2 在骨和軟骨的發(fā)育中起重要作用。BMP-2 參與 Hedgehog 通路、TGF-B信號(hào)通路和細(xì)胞因子及其受體之間的相互作用，還參與心肌細(xì)胞分化和上皮細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化。BMP-2 和 BMP-7 都是骨誘導(dǎo)性的骨形態(tài)發(fā)生蛋白，實(shí)驗(yàn)表明他們可有效誘導(dǎo)許多細(xì)胞類型中成骨細(xì)胞的分化。在可吸收膠原海綿上使用雙錐形螺紋融合器和重組人BMP-2 可維持椎間脊柱的融合、提高臨床、療效、減少患有退行性腰椎間盤疾病患者在前路腰椎椎間融合術(shù)后的疼痛。
2. 人骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 (BMP-2)酶免試劑盒檢測(cè)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗人 BMP-2 抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體，經(jīng)過孵育，樣本中存在的 BMP-2 與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合。洗滌去除未 結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中 BMP-2 的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在 450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng) 570 - 630 nm)測(cè)定吸光度 值。
3. 人骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 (BMP-2)酶免試劑盒檢測(cè)的局限:
1) 請(qǐng)?jiān)诒驹噭┖袠?biāo)示的有效期內(nèi)使用。 2) 試劑盒的試劑不能與其他批號(hào)的試劑或其他來源的試劑混合使用。 3) 任何標(biāo)準(zhǔn)品稀釋、操作人員、移液技術(shù)、洗滌技術(shù)、孵育溫度、試劑盒保存時(shí)間的改變，都將影響結(jié)合反應(yīng)。 4) 本試劑盒在設(shè)計(jì)上去除或降低了生物學(xué)樣本中的一些內(nèi)源性干擾因素，并非所有可能的影響因素都已經(jīng)去除。
4.人骨形態(tài)發(fā)生蛋白 2 (BMP-2)酶免試劑盒樣本采集與貯存
細(xì)胞培養(yǎng)上清 300 × g 離心 10 分鐘去除沉淀物，即刻檢測(cè)，或者分裝，-20℃以下貯存。
血清樣本 離心管收集血清。血樣凝集 30 分鐘后，1,000 × g 離心 10 分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測(cè)，或者分裝，-20℃以下 貯存。
血漿樣本 EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝收集血漿樣本。1,000 × g 離心 30 分鐘收集樣本。即刻檢測(cè)，或者分裝，-20℃以下貯 存。 本試劑盒可能適用于其它生物學(xué)樣本。細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清和血漿已經(jīng)過驗(yàn)證。
注意：檢測(cè)前，樣本中可見的沉淀必須去除。不要使用嚴(yán)重溶血或高血脂的樣本。樣本應(yīng)分裝并貯存于-20℃，以避 免人 BMP-2 活性的丟失。如果在 24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)。樣本可以存放在 2 - 8℃。 避免樣本的反復(fù)凍融。在檢測(cè)前，冷凍樣本應(yīng)緩慢地恢復(fù)至室溫，輕柔地混勻。
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